"ನಾವು ತಿಳಿದಿರುವಂತೆ, ಜೀವರಾಸಾಯನಿಕ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯಗಳಲ್ಲಿ PCR ಮೂಲಭೂತ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ." ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಯಾವಾಗಲೂ ಅತೃಪ್ತಿಕರವಾಗಿರುತ್ತವೆ, ಇದು PCR ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಕ್ ಉಪಭೋಗ್ಯ ವಸ್ತುಗಳ ಸ್ವಲ್ಪ ಮಾಲಿನ್ಯದ ಕಾರಣದಿಂದಾಗಿರಬಹುದು ಅಥವಾ ಪ್ರತಿರೋಧಕಗಳ ಪರಿಚಯದಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪದಿಂದ ಉಂಟಾಗಬಹುದು. ಮತ್ತೊಂದು ಪ್ರಮುಖ ಕಾರಣವಿದೆ: ಉಪಭೋಗ್ಯ ವಸ್ತುಗಳ ಅಸಮರ್ಪಕ ಆಯ್ಕೆಯು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳ ಮೇಲೆ ಉತ್ತಮ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ.
ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಫಲಿತಾಂಶಗಳ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವ ಹಲವು ಕಾರಣಗಳಿವೆ: ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಈ ಕೆಳಗಿನ 7 ವಿಧಗಳಿವೆ.
1. ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು: ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು ಪಿಸಿಆರ್ನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗೆ ಪ್ರಮುಖವಾಗಿವೆ, ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯು ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು ಮತ್ತು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಡಿಎನ್ಎ ನಡುವಿನ ಪೂರಕತೆಯ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ;
2. ಕಿಣ್ವ ಮತ್ತು ಅದರ ಸಾಂದ್ರತೆ;
3. dNTP ಯ ಗುಣಮಟ್ಟ ಮತ್ತು ಸಾಂದ್ರತೆ;
4. ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ (ಗುರಿ ಜೀನ್) ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲ;
5. Mg2+ ಸಾಂದ್ರತೆ;
6. ತಾಪಮಾನ ಮತ್ತು ಸಮಯದ ಸೆಟ್ಟಿಂಗ್;
7. ಚಕ್ರಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ;
8. ಸಲಕರಣೆಗಳು, ಉಪಭೋಗ್ಯ ವಸ್ತುಗಳು, ಇತ್ಯಾದಿ.
ಅನೇಕ ಪ್ರಭಾವ ಬೀರುವ ಅಂಶಗಳಲ್ಲಿ, ಉಪಭೋಗ್ಯವು ಬಹಳ ಮುಖ್ಯವಾದ ಮತ್ತು ಸುಲಭವಾಗಿ ಕಡೆಗಣಿಸದ ಅಂಶಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿದೆ.
ಹಲವು ವಿಧಗಳಿವೆ
PCR ಉಪಭೋಗ್ಯ ವಸ್ತುಗಳು: 8-ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು, ಕಡಿಮೆ-ಗಾತ್ರದ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು, ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು, ಸ್ಕರ್ಟ್ ಅಲ್ಲದ, ಅರೆ-ಸ್ಕರ್ಟ್ಡ್, ಪೂರ್ಣ-ಸ್ಕರ್ಟ್ಗಳು ಮತ್ತು PCR ಮತ್ತು qPCR ಪ್ಲೇಟ್ಗಳ ಸರಣಿ. ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡುವುದು ತುಂಬಾ ಕಷ್ಟ, ಮತ್ತು ಅನೇಕ ಸಾಮಾನ್ಯ ಸಮಸ್ಯೆಗಳಿವೆ, ಪ್ರತಿಯೊಬ್ಬರೂ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡುವ ಸಮಸ್ಯೆಗಳನ್ನು ನೋಡೋಣ
PCR ಉಪಭೋಗ್ಯ ವಸ್ತುಗಳು, ಮತ್ತು ಅವುಗಳನ್ನು ಹೇಗೆ ಪರಿಹರಿಸುವುದು?
ಏಕೆ ಇವೆ
PCR ಉಪಭೋಗ್ಯ ವಸ್ತುಗಳುಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ PP ಯಿಂದ ಮಾಡಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ?
ಉತ್ತರ: PCR/qPCR ಉಪಭೋಗ್ಯಗಳನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಪಾಲಿಪ್ರೊಪಿಲೀನ್ (PP) ನಿಂದ ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಜೈವಿಕವಾಗಿ ಜಡ ವಸ್ತುವಾಗಿದೆ, ಮೇಲ್ಮೈ ಜೈವಿಕ ಅಣುಗಳಿಗೆ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವುದು ಸುಲಭವಲ್ಲ ಮತ್ತು ಉತ್ತಮ ರಾಸಾಯನಿಕ ಪ್ರತಿರೋಧ ಮತ್ತು ತಾಪಮಾನ ಸಹಿಷ್ಣುತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ (121 ಡಿಗ್ರಿಗಳಲ್ಲಿ ಆಟೋಕ್ಲೇವ್ ಮಾಡಬಹುದು) ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಮತ್ತು ಥರ್ಮಲ್ ಸೈಕ್ಲಿಂಗ್ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ತಾಪಮಾನ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಸಹ ತಡೆದುಕೊಳ್ಳಬಹುದು). ಈ ವಸ್ತುಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಕಾರಕಗಳು ಅಥವಾ ಮಾದರಿಗಳೊಂದಿಗೆ ನೇರ ಸಂಪರ್ಕದಲ್ಲಿರುತ್ತವೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಉತ್ಪಾದನೆ ಮತ್ತು ತಯಾರಿಕೆಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಉತ್ತಮ-ಗುಣಮಟ್ಟದ ವಸ್ತುಗಳು ಮತ್ತು ಉತ್ತಮ ಸಂಸ್ಕರಣಾ ತಂತ್ರಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ.