ELISA ಕಿಟ್ ಪ್ರತಿಜನಕ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕಾಯದ ಘನ ಹಂತ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಜನಕ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕಾಯದ ಕಿಣ್ವ ಲೇಬಲಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ. ಘನ ವಾಹಕದ ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ಬಂಧಿತವಾದ ಪ್ರತಿಜನಕ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕಾಯವು ಇನ್ನೂ ತನ್ನ ರೋಗನಿರೋಧಕ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಉಳಿಸಿಕೊಂಡಿದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಜನಕ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಎಂದು ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ಕಿಣ್ವವು ತನ್ನ ರೋಗನಿರೋಧಕ ಚಟುವಟಿಕೆ ಮತ್ತು ಕಿಣ್ವದ ಚಟುವಟಿಕೆ ಎರಡನ್ನೂ ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ನಿರ್ಣಯದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಪರೀಕ್ಷೆಯ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಮಾದರಿಯು (ಇದರಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ) ಘನ ವಾಹಕದ ಮೇಲ್ಮೈಯಲ್ಲಿರುವ ಪ್ರತಿಜನಕ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕಾಯದೊಂದಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಿಸುತ್ತದೆ. ಘನ ವಾಹಕದ ಮೇಲೆ ರೂಪುಗೊಂಡ ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ತೊಳೆಯುವ ಮೂಲಕ ದ್ರವದಲ್ಲಿರುವ ಇತರ ಪದಾರ್ಥಗಳಿಂದ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಕಿಣ್ವ-ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳು ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಮೂಲಕ ಘನ ವಾಹಕಕ್ಕೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಘನ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಮಾಣವು ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿನ ವಸ್ತುವಿನ ಪ್ರಮಾಣಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಕಿಣ್ವ ಕ್ರಿಯೆಯ ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸಿದ ನಂತರ, ತಲಾಧಾರವು ಬಣ್ಣದ ಉತ್ಪನ್ನಗಳಾಗಲು ಕಿಣ್ವದಿಂದ ವೇಗವರ್ಧನೆಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಉತ್ಪನ್ನದ ಪ್ರಮಾಣವು ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದ ವಸ್ತುವಿನ ಪ್ರಮಾಣಕ್ಕೆ ನೇರವಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಬಣ್ಣದ ಆಳಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಗುಣಾತ್ಮಕ ಅಥವಾ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಕೈಗೊಳ್ಳಬಹುದು.
ಕಿಣ್ವಗಳ ಹೆಚ್ಚಿನ ವೇಗವರ್ಧಕ ದಕ್ಷತೆಯು ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಪರೋಕ್ಷವಾಗಿ ವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ, ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಸೂಕ್ಷ್ಮವಾಗಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಜನಕಗಳನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ELISA ಅನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು, ಆದರೆ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಸಹ ಬಳಸಬಹುದು.
ELISA ಕಿಟ್ನ ಮೂಲ ತತ್ವಗಳು
ಇದು ವಸ್ತುವನ್ನು ಕಿಣ್ವಕ್ಕೆ ಸಂಪರ್ಕಿಸಲು ಪ್ರತಿಜನಕ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ನಿರ್ಣಯಕ್ಕಾಗಿ ಕಿಣ್ವ ಮತ್ತು ತಲಾಧಾರದ ನಡುವೆ ಬಣ್ಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ. ಮಾಪನದ ವಸ್ತುವು ಪ್ರತಿಕಾಯ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಜನಕವಾಗಿರಬಹುದು.
ಈ ನಿರ್ಣಯದ ವಿಧಾನದಲ್ಲಿ ಮೂರು ಕಾರಕಗಳು ಅವಶ್ಯಕ:
â ಘನ ಹಂತದ ಪ್ರತಿಜನಕ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕಾಯ (ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ಆಡ್ಸರ್ಬೆಂಟ್)
â¡ ಕಿಣ್ವ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ಪ್ರತಿಜನಕ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕಾಯ (ಮಾರ್ಕರ್)
⢠ಕಿಣ್ವ ಕ್ರಿಯೆಗೆ ತಲಾಧಾರ (ಬಣ್ಣ ಅಭಿವೃದ್ಧಿ ಏಜೆಂಟ್)
ಮಾಪನದಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಜನಕ (ಪ್ರತಿಕಾಯ) ಮೊದಲು ಘನ ವಾಹಕಕ್ಕೆ ಬಂಧಿತವಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಇನ್ನೂ ಅದರ ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಉಳಿಸಿಕೊಂಡಿದೆ, ಮತ್ತು ನಂತರ ಪ್ರತಿಕಾಯ (ಪ್ರತಿಜನಕ) ಮತ್ತು ಕಿಣ್ವದ ಸಂಯೋಜಕ (ಮಾರ್ಕರ್) ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಇನ್ನೂ ತನ್ನ ಮೂಲ ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ಚಟುವಟಿಕೆ ಮತ್ತು ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಉಳಿಸಿಕೊಂಡಿದೆ. ಚಟುವಟಿಕೆ. ಘನ ವಾಹಕದ ಮೇಲೆ ಪ್ರತಿಜನಕ (ಪ್ರತಿಕಾಯ) ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಗವು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಿಸಿದಾಗ, ಕಿಣ್ವದ ಅನುಗುಣವಾದ ತಲಾಧಾರವನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅಂದರೆ, ವೇಗವರ್ಧಕ ಜಲವಿಚ್ಛೇದನೆ ಅಥವಾ REDOX ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಮತ್ತು ಬಣ್ಣ.
ಅದು ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ಬಣ್ಣದ ಛಾಯೆಯು ಅಳೆಯಬೇಕಾದ ಪ್ರತಿಜನಕದ (ಪ್ರತಿಕಾಯ) ಪ್ರಮಾಣಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಈ ಬಣ್ಣದ ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಬರಿಗಣ್ಣಿನಿಂದ ವೀಕ್ಷಿಸಬಹುದು, ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್, ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್, ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಫೋಟೋಮೀಟರ್ (ಕಿಣ್ವ ಲೇಬಲ್ ಉಪಕರಣ) ಮೂಲಕ ಅಳೆಯಬಹುದು. ವಿಧಾನವು ಸರಳ, ಅನುಕೂಲಕರ, ವೇಗದ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿದೆ.