> ಬ್ಲಾಗ್ > ಉದ್ಯಮ ಸುದ್ದಿ

ಜೀವಕೋಶದ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯು ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳನ್ನು ಮೊದಲು ಏಕೆ ಲೈಸ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ?

2022-12-23

ಮೂಲ ಪರಿಚಯ
ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ ಲೈಸೇಟ್ ಅತ್ಯಂತ ಸರಳ ಮತ್ತು ಸುಲಭವಾದ ವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿದೆ, ಅಂದರೆ, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೇಟೆಡ್ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಹಾನಿಗೊಳಿಸದ ಮತ್ತು ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ತೆಗೆದುಹಾಕುವ ಲೈಸೇಟ್ನೊಂದಿಗೆ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳನ್ನು ವಿಭಜಿಸುವುದು. ಲೈಸೇಟ್ ಸೀಳುವಿಕೆಯು ಸೌಮ್ಯವಾದ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣ ತೆಗೆಯುವ ವಿಧಾನವಾಗಿದೆ, ಇದನ್ನು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಕಿಣ್ವದ ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆಯಿಂದ ಹರಡಿರುವ ಅಂಗಾಂಶ ಕೋಶಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಣ, ಲಿಂಫೋಸೈಟ್‌ಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮತ್ತು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಆಮ್ಲ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ. ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಲೈಸೇಟ್‌ನಿಂದ ಪಡೆದ ಅಂಗಾಂಶ ಕೋಶಗಳು ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಸಂಸ್ಕೃತಿ, ಜೀವಕೋಶದ ಸಮ್ಮಿಳನ, ಫ್ಲೋ ಸೈಟೊಮೆಟ್ರಿ, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ನ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಇತ್ಯಾದಿಗಳಿಗೆ ಮತ್ತಷ್ಟು ಬಳಸಬಹುದು.

ಬಳಕೆಗೆ ಸೂಚನೆಗಳು
ಅಂಗಾಂಶ ಕೋಶ ಮಾದರಿ
1. ತಾಜಾ ಅಂಗಾಂಶಗಳನ್ನು ಮೇದೋಜೀರಕ ಗ್ರಂಥಿ/ಕಿಣ್ವ ಅಥವಾ ಕಾಲಜಿನೇಸ್‌ನಿಂದ ಜೀರ್ಣಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಏಕ ಕೋಶದ ಅಮಾನತುಗೊಳಿಸುವಿಕೆಗೆ ಚದುರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯಿಂದ ಸೂಪರ್‌ನಾಟಂಟ್ ಅನ್ನು ತಿರಸ್ಕರಿಸಲಾಯಿತು.

2. 4â ನಲ್ಲಿ ರೆಫ್ರಿಜರೇಟರ್‌ನಿಂದ ELS ಲೈಸೇಟ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ, ELS ಲೈಸೇಟ್ ಅನ್ನು ಸೆಲ್ ಅವಕ್ಷೇಪಕ್ಕೆ 1:3-5 ಅನುಪಾತದಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಿ (3-5ml ಲೈಸೇಟ್ ಅನ್ನು 1ml ಸೆಲ್ ಕಾಂಪ್ಯಾಕ್ಟ್‌ಗೆ ಸೇರಿಸಿ), ನಿಧಾನವಾಗಿ ಬ್ಲೋ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.

3. 5-8 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 800-1000rpm ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮತ್ತು ಮೇಲಿನ ಕೆಂಪು ಸ್ಪಷ್ಟ ದ್ರವವನ್ನು ತಿರಸ್ಕರಿಸಿ.

4. ಅವಕ್ಷೇಪಿತ ಭಾಗವನ್ನು 2-3 ಬಾರಿ ಹ್ಯಾಂಕ್‌ನ ದ್ರಾವಣ ಅಥವಾ ಸೀರಮ್-ಮುಕ್ತ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯ ಪರಿಹಾರದೊಂದಿಗೆ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು.

5, ಕ್ರ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಪೂರ್ಣವಾಗಿಲ್ಲದಿದ್ದರೆ/ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ಹಂತಗಳು 2 ಮತ್ತು 3 ಅನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸಬಹುದು.

6. ನಂತರದ ಪ್ರಯೋಗಗಳಿಗೆ ಮರುಹೊಂದಿಸುವ ಕೋಶಗಳು; ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಹೊರತೆಗೆದರೆ, ಡಿಇಪಿಸಿ ನೀರನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಹಂತ 4 ರಿಂದ ತಯಾರಿಸಿದ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಹಾಗೆ ಮಾಡುವುದು ಉತ್ತಮ.

ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು ಬಹಳ ಕಡಿಮೆ ಜೀವನ ಚಕ್ರವನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ, ಕೇವಲ 120 ದಿನಗಳು, ಆದರೆ ಅವು ರಕ್ತವನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿ ಮಾಡುತ್ತವೆ, ಮತ್ತು ಈ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ ಅವು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಕೋಶ ವಿಭಜನೆಗೆ ಸಮರ್ಥವಾಗಿವೆ ಮತ್ತು ಅವು ಎಲ್ಲಕ್ಕಿಂತ ವೇಗವಾಗಿ ವಿಭಜಿಸುವ ಕೋಶಗಳಾಗಿವೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಈ ಕೋಶವು ಬಹಳ ಮೌಲ್ಯಯುತವಾಗಿದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಇದು ಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗೆ ತುಂಬಾ ಉಪಯುಕ್ತವಾಗಿದೆ. ಇದು ತುಂಬಾ ಸರಳವಾಗಿದೆ, ಅದರಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಅಂಗಕಗಳಿಲ್ಲ, ಕೇವಲ ಜೀವಕೋಶ ಪೊರೆಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು.

ಹಿಂದಿನ:ELISA ಕಿಟ್‌ನ ಕಾರ್ಯಗಳು ಯಾವುವು?

ಮುಂದೆ:ಕಾರಕದ ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳು ಮತ್ತು ಪರಿಹಾರದ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಮೂಲ ಪ್ರಾತಿನಿಧ್ಯ.